腮腺炎病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）

【產品名稱】

通用名稱：腮腺炎病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）

【包裝規格】

96人份/盒

【預期用途】

本產品用于體外定性檢測人血清/血漿或全血樣本中的腮腺炎病毒IgG抗體。

適用于腮腺炎病毒感染的輔助診斷；含腮腺炎成分疫苗接種后體內腮腺炎病毒IgG抗體檢測及正?；蛞赘腥巳?/span>體內腮腺炎病毒IgG抗體檢測。

腮腺炎病毒屬于副粘病毒科副粘病毒屬，僅有一個血清型，根據編碼小分子疏水蛋白基因（SH基因）的序列差異可將其分成不同的基因型。病毒為單鏈RNA病毒，外有來自宿主細胞的脂質膜包繞，病毒表面有兩個組分，血凝素-神經氨酸酶蛋白和溶解蛋白，對病毒毒力起著重要作用。血凝素-神經氨酸酶蛋白的抗體具有中和病毒的作用，病毒可在許多細胞包括雞胚細胞中復制。

腮腺炎初始癥狀一般為非特異性的，例如肌痛、頭痛、不適和低熱，1天以內會出現典型的單側或雙側腮腺腫大，10%的病例可見其它唾液腺明顯累及的癥狀。大約1周以后，發熱和腮腺腫脹消退，除非出現并發癥，疾病一般會痊愈。約30%的病例僅僅出現非特異性的癥狀或無癥狀。2歲以下兒童感染后大多為亞臨床型，腮腺腫大前2天到腮腺腫大后9天具有傳染性，沒有特異性治療方法。盡管可能出現并發癥，腮腺炎一般為輕型的自限性疾病，病死率僅為1/10000。50%～60%的病人可出現腦脊液白細胞增多（>5個/mm³），但沒有腦炎/腦膜炎表現；有腦膜炎癥狀者可達15%。0.02%～0.3%的病例可出現腮腺炎腦炎。雖然腮腺炎腦炎病死率低，但可出現永久性后遺癥，如麻痹、驚厥、顱神經癱瘓、導水管狹窄和腦水腫。腮腺炎引起的后天感音神經性聾是兒童期耳聾的主要病因之一，大約會出現在5/10萬的腮腺炎患者中。青春期后的男性患腮腺炎后，約20%會出現睪丸炎，其中20%可累及雙側，但腮腺炎繼發睪丸炎很少引起不育。有癥狀的卵巢炎和乳腺炎少見，且不會出現永久性后遺癥。懷孕12周內感染腮腺炎，有25%可出現自發性流產，但孕期感染腮腺炎病毒，未見有胎兒畸形的報道。大約4%的病例會并發胰腺炎，但腮腺炎引起的胰腺炎與糖尿病的關系尚不肯定。

一般自然感染后可獲得終生保護，但也有腮腺炎復發的報道。鼻咽腔粘膜分泌的IgA抗體具有中和腮腺炎病毒的作用，可被視為第一道防線。腮腺炎的免疫力與血清特異性抗體相關。尚不清楚終生免疫是否必須通過在人群中循環的野病毒對機體免疫系統的自然加強而達到。使用常用的免疫學方法檢測血清特異性IgG抗體可證明機體的免疫力。

目前檢測腮腺炎病毒特異性的IgG抗體的主要方法有：中和試驗、血凝抑制試驗、酶聯免疫法（ELISA）等。

【檢驗原理】

試劑盒采用酶聯免疫間接法原理。

本試劑盒系用滅活純化腮腺炎病毒抗原包被微孔板。樣品加入微孔后，其中抗腮腺炎病毒抗體與微孔中固相化腮腺炎病毒抗原形成抗原-抗體免疫復合物，洗滌去除未結合物，加入辣根過氧化酶標記小鼠抗人IgG單克隆抗體，與復合物反應形成抗原-抗體-酶標二抗復合物，洗滌去除未參與反應的酶結合物，加TMB底物顯色，呈色的深淺與腮腺炎病毒IgG抗體的含量成正比。

【主要組成成份】

【儲存條件及有效期】

1. 于2~8℃冷藏、避光保存，禁止冷凍，有效期為12個月。

2. 未用完的預包被板應立即與干燥劑一起放入自封袋中密封，2~8℃環境中保存時間不得超過一周。

3. 未用完的其他組份試劑應立即將瓶蓋蓋好，置于2~8℃環境中保存，保存時間不得超過一周。

4. 產品的生產日期及有效期至詳見產品標簽。

【適用儀器】

含450nm波長的酶標儀或全自動酶免分析儀。

【樣本要求】

1. 人血清/血漿或全血均可用作測定樣本?？鼓齽ǜ嗡?、EDTA、檸檬酸鈉）對樣本檢測結果無干擾。

2. 血清/血漿樣品2～8℃冷藏保存可穩定4天，但建議在72小時內使用；全血樣本即采即用；若需長期保存，血清/血漿樣品可直接-20℃冷凍保存可穩定一年，全血樣本可用樣品稀釋液稀釋后吸出上清液，-20℃冷凍保存可穩定一年。凍存的樣本凍融次數建議不超過3次。

3. 應避免使用溶血、脂血樣本，不能使用被污染的樣本。

【檢驗方法】

1.樣品準備

1.1 先向1.5ml離心管中加入樣品稀釋液500μl。編號。

1.2 采集全血10μl，或吸取血清/血漿5μl，加入相應的離心管中，立即輕搖、混勻。

1.3 若為全血樣品，將離心管置室溫（或4℃冰箱）靜置，待紅血球全部沉降到孔底，取上清液檢測；若為血清或血漿樣品，混勻后即可使用。

2. 將試劑盒和樣品從冷藏環境中取出，放置30分鐘，平衡至室溫；恒溫箱或水浴鍋調節至37±1℃。

3. 配制洗滌液：1倍體積的濃縮洗滌液加入19倍體積的蒸餾水、純化水或去離子水，混勻。

4. 加樣：每次試驗設陽性對照1孔、陰性對照1孔，每孔加入相應的對照液100μl；設空白對照1孔，加樣品稀釋液100μl；其余每孔加入已稀釋的樣品（全血樣品取上清液）100μl。貼上封口膜，置37℃溫育60分鐘后，小心將封口膜揭掉，倒掉孔中的液體。每孔加300μl已稀釋好的洗滌液，輕微振搖10秒后倒掉，拍干。重復5次。有條件的可按上述洗滌條件設置參數，用洗板機洗滌。

5. 加抗人IgG抗體酶標記物：每孔100μl（空白孔不加）。貼上封口膜，置37℃溫育30分鐘后，小心將封口膜揭掉，倒掉孔中的液體。每孔加300μl已稀釋好的洗滌液，輕微振搖10秒后倒掉，拍干。重復5次。

6. 顯色：每孔加底物液A及底物液B各50μl，混勻。貼上封口膜，置37℃避光顯色15分鐘。

7. 測定：小心將封口膜揭掉，每孔加終止液50μl，混勻。30分鐘內用酶標儀雙波長450nm/630nm測定各孔OD值(使用單波長450nm時，必須以空白孔調零）。

【陽性判斷值】

1.陰性對照OD₄₅₀＜0.3，陽性對照OD₄₅₀≥0.6，試驗成立。

2.Cut-Off 值=陰性對照OD₄₅₀值 × 2.1，S/CO值=；

0.9≤S/CO值＜1.1，判為可疑，建議重復檢測；

S/CO值≥1.1，判為陽性；

S/CO值＜0.9，判為陰性。

【檢驗結果的解釋】

1. 陽性結果：S/CO值≥1.1，表示樣本中腮腺炎病毒IgG抗體為陽性。

2. 陰性結果：S/CO值＜0.9，表示樣本中腮腺炎病毒IgG抗體為陰性。

3. 可疑結果：0.9≤S/CO值＜1.1，表示樣本中腮腺炎病毒IgG抗體為處于臨界值，建議重復檢測或兩周后再次檢測，動態觀察抗體水平的變化。

【檢驗方法的局限性】

僅用于腮腺炎病毒感染的輔助診斷及腮腺炎病毒IgG抗體的定性檢測。