水痘-帶狀皰疹病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）

【產品名稱】

通用名稱：水痘-帶狀皰疹病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）

【包裝規格】

96人份/盒

【預期用途】

本產品用于體外定性檢測人血清/血漿或全血樣本中的水痘-帶狀皰疹病毒IgG抗體。

適用于水痘-帶狀皰疹病毒感染的輔助診斷、水痘疫苗接種后體內水痘-帶狀皰疹病毒IgG抗體檢測及正?；蛞赘腥巳?/span>體內水痘-帶狀皰疹病毒IgG抗體檢測。

水痘-帶狀皰疹病毒（VZV）屬皰疹病毒屬α皰疹病毒亞科，是一種雙鏈DNA病毒，人類是其唯一的傳播宿主。水痘-帶狀皰疹通過鼻咽部粘膜進入人體，幾乎總會使易感個體發病。潛伏期通常為14～16（10～21）天。水痘出現之后，病毒停留在感覺神經中樞，以后再激活時可發生帶狀皰疹。

水痘-帶狀皰疹病毒（VZV）是一種高度傳染性疾病，在全球均有發生，未實施疫苗接種之前，大多數人至中年期幾乎都受過感染。水痘的流行病學在溫帶與熱帶氣候之間存在差異。水痘-帶狀皰疹病毒（VZV）可引起兩種不同的疾病，即水痘和帶狀皰疹。免疫功能正常的個體可能于發生皮疹前1或2天出現不適及發熱前驅期癥狀，但這些癥狀往往被描述為與特征性皮疹同時出現，特征性皮疹是水痘和天花的主要區別之一。皮疹分批出現，每一批皮疹通常在24 小時內從斑點進展為丘疹、小水泡、膿皰并最終結痂。新一批皮損于5～6天后發生，而因病程中可見處于不同愈合階段的皮損。皮損伴有瘙癢并可結疤。與其他成人相比，孕婦（尤其是妊娠后3個月）所患的水痘更為嚴重，患有水痘的孕婦其胎兒的水痘發病率顯著升高。妊娠期間患水痘的母親其嬰兒可出現先天性水痘綜合征。免疫功能低下的個體患水痘時病情更嚴重，成為進展性水痘。

幾乎所有免疫功能正常者在自然感染后都會對水痘產生終身免疫。新生兒在頭幾個月里會從具有免疫力的母親那里被動獲得抗體保護。未免疫的個體在病毒感染3天內通過注射水痘-帶狀皰疹免疫球蛋白可以獲得暫時性保護?；妓黄陂g獲得的免疫力既不能防止可能的VZV感染，也不能預防帶狀皰疹病毒隨后的再激活。雖然可以很方便地利用抗體檢測來提示先前感染或接種疫苗的免疫反應，但是，測不出VZV抗體并不能認為該個體易感，因為其對應的細胞介導免疫可能依然是完整的。另外，55～65歲的人群中大約20%盡管有抗體，但并沒有檢測到細胞介導性的VZV免疫。帶狀皰疹與VZV特異性T細胞水平的降低密切相關，并且帶狀皰疹會再激活特異性T細胞反應。接種水痘疫苗產生的免疫力會持續10～20年。兒童期接種水痘疫苗，有70%～90%可獲得免疫保護，免疫后7～10年有95%以上可預防重癥水痘發生。

目前檢測水痘-帶狀皰疹病毒特異性的IgG抗體的主要方法有：膜抗原熒光抗體實驗（FAMA）、乳膠凝集法（LA）、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）等。

【檢驗原理】

試劑盒采用酶聯免疫間接法原理。

本試劑盒系用滅活純化水痘-帶狀皰疹病毒抗原包被微孔板。樣品加入微孔后，其中抗水痘-帶狀皰疹病毒抗體與微孔中固相化水痘-帶狀皰疹病毒抗原形成抗原-抗體免疫復合物，洗滌去除未結合物，加入辣根過氧化酶標記小鼠抗人IgG單克隆抗體，與復合物反應形成抗原-抗體-酶標二抗復合物，洗滌去除未參與反應的酶結合物，加TMB底物顯色，呈色的深淺與水痘-帶狀皰疹病毒IgG抗體的含量成正比。

【主要組成成份】

【儲存條件及有效期】

1. 于2~8℃冷藏、避光保存，禁止冷凍，有效期為12個月。

2. 未用完的預包被板應立即與干燥劑一起放入自封袋中密封，2~8℃環境中保存時間不得超過一周。

3. 未用完的其他組份試劑應立即將瓶蓋蓋好，置于2~8℃環境中保存，保存時間不得超過一周。

4. 產品的生產日期及有效期至詳見產品標簽。

【適用儀器】

含450nm波長的酶標儀或全自動酶免分析儀。

【樣本要求】

1. 人血清/血漿或全血均可用作測定樣本?？鼓齽ǜ嗡?、EDTA、檸檬酸鈉）對樣本檢測結果無干擾。

2. 血清/血漿樣品2～8℃冷藏保存可穩定4天，但建議在72小時內使用；全血樣本即采即用；若需長期保存，血清/血漿樣品可直接-20℃冷凍保存可穩定一年，全血樣本可用樣品稀釋液稀釋后吸出上清液，-20℃冷凍保存可穩定一年。凍存的樣本凍融次數建議不超過3次。

3. 應避免使用溶血、脂血樣本，不能使用被污染的樣本。

【檢驗方法】

1.樣品準備

1.1 先向1.5ml離心管中加入樣品稀釋液500μl。編號。

1.2 采集全血10μl，或吸取血清/血漿5μl，加入相應的離心管中，立即輕搖、混勻。

1.3 若為全血樣本，將離心管置室溫（或4℃冰箱）靜置，待紅血球全部沉降到孔底，取上清液檢測；若為血清或血漿樣本，混勻后即可使用。

2. 將試劑盒和樣品從冷藏環境中取出，放置30分鐘，平衡至室溫；恒溫箱或水浴鍋調節至37±1℃。

3. 配制洗滌液：1倍體積的濃縮洗滌液加入19倍體積的蒸餾水、純化水或去離子水，混勻。

4. 加樣：每次試驗設陽性對照1孔、陰性對照1孔，每孔加入相應的對照液100μl；設空白對照1孔，加樣品稀釋液100μl；其余每孔加入已稀釋的樣品（全血樣品取上清液）100μl。貼上封口膜，置37℃溫育60分鐘后，小心將封口膜揭掉，倒掉孔中的液體。每孔加300μl已稀釋好的洗滌液，輕微振搖10秒后倒掉，拍干。重復5次。有條件的可按上述洗滌條件設置參數，用洗板機洗滌。

5. 加抗人IgG抗體酶標記物：每孔100μl（空白孔不加）。貼上封口膜，置37℃溫育30分鐘后，小心將封口膜揭掉，倒掉孔中的液體。每孔加300μl已稀釋好的洗滌液，輕微振搖10秒后倒掉，拍干。重復5次。

6. 顯色：每孔加底物液A及底物液B各50μl，混勻。貼上封口膜，置37℃避光顯色15分鐘。

7. 測定：小心將封口膜揭掉，每孔加終止液50μl，混勻。30分鐘內用酶標儀雙波長450nm/630nm測定各孔OD值(使用單波長450nm時，必須以空白孔調零）。

【陽性判斷值】

1.陰性對照OD₄₅₀＜0.3，陽性對照OD₄₅₀≥0.6，試驗成立。

2.Cut-Off 值=陰性對照OD₄₅₀值 × 2.1，S/CO值=；

0.9≤S/CO值＜1.1，判為可疑，建議重復檢測；

S/CO值≥1.1，判為陽性；

S/CO值＜0.9，判為陰性。

【檢驗結果的解釋】

1. 陽性結果：S/CO值≥1.1，表示樣本中水痘-帶狀皰疹病毒IgG抗體為陽性。

2. 陰性結果：S/CO值＜0.9，表示樣本中水痘-帶狀皰疹病毒IgG抗體為陰性。

3. 可疑結果：0.9≤S/CO值＜1.1，表示樣本中水痘-帶狀皰疹病毒IgG抗體為處于臨界值，建議重復檢測或兩周后再次檢測，動態觀察抗體水平的變化。

【檢驗方法的局限性】

僅用于水痘-帶狀皰疹病毒感染的輔助診斷及水痘-帶狀皰疹病毒IgG抗體的定性檢測。