【產品名稱】

通用名稱：風疹病毒lgG抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）

【包裝規格】

96人份／盒

【預期用途】

本產品用于體外定性檢測人血清／血漿或全血樣本中的風疹病毒lgG抗體。適用于風疹病毒感染的輔助診斷。

風疹病毒是一種包膜病毒，屬風疹病毒科，僅有一種血清型，與其他包膜病毒無交叉反應。風疹是一種急性病毒感染，在全球范圍內一般僅影響易感兒童和年輕成人。風疹的發生具有季節性，且每5～9年發生一次流行。流行的程度和周期性在發達國家和發展中國家不同，可能與各國的免疫接種情況不同相關，在開展大規模風疹疫苗接種前兒童感染風疹的平均年齡為2～12歲。風疹病毒通過呼吸道傳播，一開始在鼻咽部黏膜及局部淋巴結復制，潛伏期為12～23天，風疹的臨床癥狀如一般感冒，通常先有上感一般癥狀及耳后和枕下淋巴結腫大，隨后面部出現潛紅色斑丘疹并迅速遍及全身。婦女妊娠期感染可能引起胎兒死亡或先天性風疹綜合癥。

風疹病毒感染14～18天可檢測出抗體，此時大約同步出現斑丘疹。lgM和lgG抗體滴度初起均出現上升，隨后lgG持續處于較高滴度，而lgM抗體滴度迅速降低，lgG水平在感染至4～6周后達到高峰，然后逐漸下降到某一水平并持續終生。

目前風疹病毒lgG的臨床和實驗室檢測方法主要有間接血凝抑制試驗、乳膠凝集試驗、酶聯免疫吸附、單向輻射狀溶血實驗和熒光抑制試驗等。

【檢驗原理】

試劑盒采用酶聯免疫間接法原理。

本試劑盒系用滅活純化風疹病毒抗原包被微孔板。樣品加入微孔后，其中抗風疹病毒抗體與微孔中固相化風疹病毒抗原形成抗原-抗體免疫復合物，洗滌去除未結合物，加入辣根過氧化酶標記小鼠抗人lgG單克隆抗體，使其反應形成抗原-抗體-酶標二抗復合物，洗滌未參與反應的酶結合物，加TMB底物顯色，呈色的深淺與風疹病毒lgG抗體的含量成正比。

【主要組成成分】

【儲存條件及有效期】

1．于2～8℃避光保存，禁止冷凍，有效期為12個月。

2．未用完的板條應立即放于密封袋中封存。開封過的試劑盒應在一周內用完。

3．生產日期及失效日期等見標簽。

【適用儀器】

含450nm波長的酶標儀或全自動酶免分析儀。

【樣品要求】

1．人血清／血漿或全血均可用作測定樣本?？鼓齽ǜ嗡?、EDTA、檸檬酸鈉）對樣本檢測結果無干擾。

2．血清／血漿樣品2～8℃冷藏保存可穩定一周，但建議在72小時內使用；全血樣本即采即用；若需長期保存，血清／血漿樣品可直接-20℃冷凍保存可穩定一年，全血樣本可用樣品稀釋液稀釋后吸出上清液，-20℃冷凍保存可穩定一年。凍存的樣本凍融次數建議不超過3次。

3．應避免使用溶血、脂血樣本，不能使用被污染的樣本。

【檢驗方法】

1．樣品準備

1.1 先向1.5ml離心管中加入樣品稀釋液500μl。編號。

1.2采集全血10μl，或吸取血清／血漿5μl，加入相應的離心管中，立即輕搖、混勻。

1.3 若為全血樣品，將離心管置室溫（或4℃冰箱）靜置，待紅血球全部沉降到孔底，取上清液檢測；若為血清或血漿樣品，混勻后即可使用。

2．將試劑盒和樣品從冷藏環境中取出，放置30分鐘，平衡至室溫；恒溫箱或水浴鍋調節至37±1℃。

3．配制洗滌液：1倍體積的濃縮洗滌液加入19倍體積的蒸餾水、純化水或去離子水，混勻。

4. 加樣：每次試驗設陽性對照1孔、陰性對照1孔，每孔加入相應的對照液100μl；設空白對照1孔，加樣品稀釋液100μl；其余每孔加入已稀釋的樣品（全血樣本取上清液）100μl。貼上封口膜，置37℃溫育60分鐘后，小心將封口膜揭掉，倒掉孔中的液體。每孔加300μl已稀釋好的洗滌液，輕微振搖10秒后倒掉，拍干。重復5次。有條件的可按上述洗滌條件設置參數，用洗板機洗滌。

5．加抗人lgG抗體酶標記物：每孔100μl（空白孔不加）。貼上封口膜，置37℃溫育30分鐘后，小心將封口膜揭掉，倒掉孔中的液體。每孔加300μl 已稀釋好的洗滌液，輕微振搖10秒后倒掉，拍干。重復5次。

6．顯色：每孔加底物液A及底物液B各50μl，混勻。貼上封口膜，置于37℃避光顯色15分鐘。

7．測定：小心將封口膜揭掉，每孔加終止液50μl，混勻。30分鐘內用酶標儀雙波長450nm／630nm測定各孔OD值（使用單波長450nm時，必須以空白孔調零）。

【參考值】

1．陰性對照OD₄₅₀＜0.3，陽性對照OD₄₅₀≥0.6，試驗成立。

【檢驗結果的解釋】

1．陽性結果：提示風疹病毒既往感染或產生風疹病毒抗體。

2．陰性結果：提示無風疹病毒既往感染或無風疹病毒抗體。

3．可疑結果：建議重復檢測或兩周后再次檢測，動態觀察抗體水平的變化。

【檢驗方法的局限性】

僅用于風疹病毒感染的輔助診斷及風疹病毒lgG抗體的定性檢測。