麻疹病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）

【產品名稱】

通用名稱：麻疹病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）

【包裝規格】

96人份/盒

【預期用途】

本產品用于體外定性檢測人血清、血漿或全血樣本中的麻疹病毒IgG抗體滴度是否達到200 mIU/ml。

適用于麻疹病毒感染的輔助診斷、體外檢測人體內抗麻疹病毒IgG抗體滴度是否達到200mIU/ml。

麻疹病毒是一種球形、非節段的、單股負鏈RNA病毒，直徑為120～125nm，在病毒學上屬副粘病毒科麻疹病毒屬。麻疹病毒主要通過呼吸道飛沫實現人與人的傳播，此外還可以氣溶膠的形式通過空氣傳播。病毒在前驅期的傳染性最強，在易感家庭（和機構）人群中的二代發病率較高，可達到90%甚至以上。由于病例在出診前、后均可排毒，平均在家庭內首發病例出診后的14～15天，繼發病例即可出現皮疹。幾乎所有原發病例（除體內仍有母傳抗體或注射了免疫球蛋白的病例外）均呈顯性感染。目前尚無證據表明免疫人群暴露后可不出現癥狀但傳播病毒。

臨床表現為呼吸道暴露后，經過10～12天的潛伏期，前期的臨床癥狀開始出現。如果皮膚或黏膜破損后發生暴露，潛伏期可縮短至2～4天；免疫功能抑制的患者潛伏期可能會延長。前驅期主要表現為發熱、全身乏力、結膜炎、鼻炎和支氣管炎（如咳嗽），可持續2～4天，這些癥狀與一般的上呼吸道感染類似。隨后4天內，體溫明顯上升，可達到40.6℃?？率习弑徽J為是麻疹特有的一種黏膜疹，出現于皮疹前1～2天的頰粘膜處，也可持續至疹后1～2天。病毒暴露14天后，病例出現紅斑丘疹，從頭部（臉、前額、發線、耳后和上頸部）經軀干至四肢，約需3～4天。皮疹通常集中于面部和軀體上半部，壓之褪色。隨后3～4天，皮疹按照出診順序開始消退，并遺留淺褐色色素沉著。

在自然感染麻疹病毒后，人體可出現長期（可能是終生）的免疫記憶，其中包括不斷產生麻疹病毒特異性抗體和循環系統中的麻疹病毒特異性CD4+和CD8+ T淋巴細胞。麻疹疫苗可誘導與自然感染相當的體液免疫和細胞免疫，不過抗體滴度通常較低。 此外，與自然感染過麻疹的產婦相比，接種麻疹疫苗的產婦所生嬰兒體內的母傳抗體平均濃度也較低。接種麻疹疫苗后， 血液中可出現一過性的、麻疹特異性免疫球蛋白IgM 抗體，而粘膜分泌液中則出現 IgA 抗體；IgG抗體可在血液中持續存在多年，同時，世界衛生組織（WHO）在“免疫接種系列之免疫學基礎（第七部分：麻疹）”中表示，使用NIBSC第二代國際標準品（NIBSC code：66/202）進行溯源，人體內抗麻疹病毒IgG抗體最低保護水平為200mIU/ml。

目前檢測麻疹病毒特異性的IgG抗體的主要方法有：血凝抑制試驗（HI）、補體結合試驗（CF）、蝕斑減少中和試驗（PRNT）、微量細胞病變抑制試驗、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）等。

【檢驗原理】

試劑盒采用酶聯免疫間接法原理。

本試劑盒系用滅活純化麻疹病毒抗原包被微孔板。樣品加入微孔后，其中抗麻疹病毒抗體與微孔中固相化麻疹病毒抗原形成抗原-抗體免疫復合物，洗滌去除未結合物，加入辣根過氧化酶標記小鼠抗人IgG單克隆抗體，與復合物反應形成抗原-抗體-酶標二抗復合物，洗滌去除未參與反應的酶結合物，加TMB底物顯色，呈色的深淺與麻疹病毒IgG抗體的含量成正比。

【主要組成成分】

【儲存條件及有效期】

1. 于2~8℃冷藏、避光保存，禁止冷凍，有效期為12個月。

2. 未用完的預包被板應立即與干燥劑一起放入自封袋中密封，2~8℃環境中保存時間不得超過一周。

3. 未用完的其他組分試劑應立即將瓶蓋蓋好，置于2~8℃環境中保存，保存時間不得超過一周。

4. 產品的生產日期及有效期至詳見產品標簽。

【適用儀器】

含450nm波長的酶標儀或全自動酶免分析儀。

【樣本要求】

1. 人血清/血漿或全血均可用作測定樣本?？鼓齽ǜ嗡?、EDTA、檸檬酸鈉）對樣本檢測結果無干擾。

2. 血清/血漿樣品2～8℃冷藏保存可穩定4天，但建議在72小時內使用；全血樣本即采即用；若需長期保存，血清/血漿樣品可直接-20℃冷凍保存可穩定一年，全血樣本可用樣品稀釋液稀釋后吸出上清液，-20℃冷凍保存可穩定一年。凍存的樣本凍融次數建議不超過3次。

3. 應避免使用溶血、脂血樣本，不能使用被污染的樣本。

【檢驗方法】

1. 樣品準備

1.1 先向1.5ml離心管中加入樣品稀釋液500μl。編號。

1.2 采集全血10μl，或吸取血清/血漿5μl，加入相應的離心管中，立即輕搖、混勻。

1.3 若為全血樣品，將離心管置室溫（或4℃冰箱）靜置，待紅血球全部沉降到孔底，取上清液檢測；若為血清或血漿樣品，混勻后即可使用。

2. 將試劑盒和樣品從冷藏環境中取出，放置30分鐘，平衡至室溫；恒溫箱或水浴鍋調節至37±1℃。

3. 配制洗滌液：1倍體積的濃縮洗滌液加入19倍體積的蒸餾水、純化水或去離子水，混勻。

4. 加樣：每次試驗設陽性對照1孔、陰性對照1孔，每孔加入相應的對照液100μl；設空白對照1孔，加樣品稀釋液100μl；其余每孔加入已稀釋的樣品（全血樣品取上清液）100μl。貼上封口膜，置37℃溫育60分鐘后，小心將封口膜揭掉，倒掉孔中的液體。每孔加300μl已稀釋好的洗滌液，輕微振搖10秒后倒掉，拍干。重復5次。有條件的可按上述洗滌條件設置參數，用洗板機洗滌。

5. 加抗人IgG抗體酶標記物：每孔100μl（空白孔不加）。貼上封口膜，置37℃溫育30分鐘后，小心將封口膜揭掉，倒掉孔中的液體。每孔加300μl已稀釋好的洗滌液，輕微振搖10秒后倒掉，拍干。重復5次。

6. 顯色：每孔加底物液A及底物液B各50μl，混勻。貼上封口膜，置37℃避光顯色15分鐘。

7. 測定：小心將封口膜揭掉，每孔加終止液50μl，混勻。30分鐘內用酶標儀雙波長450nm/630nm測定各孔OD值(使用單波長450nm時，必須以空白孔調零）。

【陽性判斷值】

1. 陰性對照OD₄₅₀＜0.3，陽性對照OD₄₅₀≥0.6，試驗成立。

2. Cut-Off 值 = 陰性對照OD₄₅₀值 × 2.1，S/CO值 =

0.9≤S/CO值＜1.1，判為可疑，建議重復檢測；

S/CO值≥1.1，判為陽性；

S/CO值＜0.9，判為陰性。

【檢驗結果的解釋】

1. 陽性結果：S/CO值≥1.1，表示樣本中麻疹病毒IgG抗體滴度不低于200mIU/ml。

2. 陰性結果：S/CO值＜0.9，表示樣本中麻疹病毒IgG抗體滴度低于200mIU/ml。

3. 可疑結果：0.9≤S/CO值＜1.1，表示樣本中麻疹病毒IgG抗體為處于臨界值，建議重復檢測或兩周后再次檢測，動態觀察抗體水平的變化。

【檢驗方法的局限性】

僅用于麻疹病毒感染的輔助診斷及麻疹病毒IgG抗體的定性檢測。